恒温摇床在蛋白质免疫反应中的应用

恒温摇床在蛋白质免疫反应中的应用：

① 封闭：将转膜后的PVDF膜浸没在5%脱脂奶粉封闭液中封闭，摇床 50～60转， 2 小时（室温）。

② 一抗孵育：根据抗体说明书选择适当浓度稀释抗体，将稀释好的抗体加入抗体孵育盒，并将PVDF膜放入其中，摇床50～60转,4℃孵育过夜。次日取出，TBST洗膜（3次/15 min，60转）。

③ 二抗孵育：将二抗稀释为合适的浓度，PVDF膜放入稀释的二抗工作液中，室温孵育1小时，摇床80转。孵育结束后，取出PVDF膜，TBST洗膜（3次/15 min，80转）

④ 显影：吸取适量的化学发光试剂A液和B液，等体积混合，均匀加在PVDF膜上，孵育数十秒，使用凝胶成像系统曝光并获取图像。经凝胶成像系统测量条带灰度值，计算实验蛋白的相对表达量