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用冷光源培养箱培养拟南芥

更新时间:2019-09-18      点击次数:1543

拟南芥作为高等植物的模式生物被*的植物生物学实验室广泛研究。芥培养可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。然而,怎么培养好这种小植物可能不是那么容易。

1、首先把拟南芥种子放到滤纸上,用70%酒精进行消毒处理,再用*进行处理(也可选择20%漂白剂以及0.05% Triton X-100 非离子表面活性剂做杀菌处理20分钟)。用无菌水冲洗5遍,然后将种子点到MS培养基上,pH5.9,另加0.9%琼脂以及2%蔗糖。


2、把种子放到冷光源培养箱中,设置4℃黑暗条件下进行春化48h-72h左右,在长日照或短日照条件下催芽。利用PLC控制器,编辑简单的昼夜模式,设定光照时间16小时(黑暗8小时)或者光照14小时(黑暗10小时);选配Q23+连续光强调节装置,设定光照强度为100-150umol/m2.s;设定室内温度为光照条件下20-22℃,黑暗条件下18-20℃;选配湿度控制系统,设定室内相对湿度70%。


3、出苗大约7~10天,然后移入土中培养,采用底部灌溉方式浇水(利用土壤的毛细作用)。在*次浇水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天浇一次水。


4、土壤可用营养土、蛭石以及珍珠岩比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等进行混合。在生长过程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。


5、当植株长到一定高度时,可剪断茎杆,以产生更多的花序,可用于转化研究或者获得更多的种子

拟南芥培养箱特殊培养
为了加快拟南芥生长速度,在移入土壤培养后,可设定长日照,利用PLC控制器,编辑程序设定24h光照,光强100-250umol/m2.s,温度持续22-23℃。
拟南芥根系处理培养,可减少光照时间为8-12h,提高光照强度为100-350umol/m2.s,温度为光照条件下22-23℃,黑暗条件下18-20℃,其余培养条件同正常培养。

 

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